KASP基因分型介紹
KASP(Kompetitive Allele-Specific PCR),即競爭性等位基因特異性PCR,原理上與TaqMan檢測法類似,都是基于終端熒光信號的讀取判斷,每孔反應都是采用雙色熒光檢測一個SNP位點的兩種基因型,不同的SNP對應著不同的熒光信號。
KASP技術與TaqMan法類似,它與TaqMan技術不同的是,它不需要每個SNP位點都合成特異的熒光引物,它基于*的ARM PCR原理,所有的位點檢測終都可以使用通用熒光引物進行擴增,這降低了KASP技術的試劑成本,既有準確度,又降低了成本,更具SNP位點適用性,因此在醫(yī)學、農(nóng)學檢測方面KASP技術都有很好的應用潛力,如癌癥、代謝疾病、心血管疾病、糖尿病、動植物育種、水產(chǎn)養(yǎng)殖等研究。
技術原理
KASP反應包括Primer Mix和Master Mix兩種主要成分。Primer Mix由兩條末端堿基不同的等位基因正向引物與一條反向引物構成,兩條正向引物5’端分別連有不同序列的檢測引物序列。Master Mix包含兩條帶有不同熒光的檢測引物。
1、變性模板與Primer Mix中相匹配的引物結合并退火,延伸后序列被加上了檢測引物的序列。
2、等位基因特異性的末端序列的互補鏈合成。
3、帶有不同熒光的兩條檢測引物與互補鏈結合,特異序列對應的檢測引物隨PCR反應指數(shù)性擴增,相應熒光信號被檢測。
4、數(shù)據(jù)分析。
實驗過程:
實驗結果:
KASP技術優(yōu)勢
1、只需要合成兩條通用熒光探針,節(jié)省了探針的合成費用。
2、支持低、中、高通量研究,以及單個重復實驗。
3、對PCR儀和熒光定量儀等儀器設備具有良好的兼容性。
我們的優(yōu)勢
1、提供各種實驗材料和儀器,滿足項目課題實驗需要。
2、專業(yè)的操作人員。
3、高規(guī)格實驗室。
4、數(shù)據(jù)結果交付周期快。
5、完善的服務體系,全程跟進,確保滿意。
服務流程
1、提交項目課題相關需求和資料。
2、與我們的專業(yè)技術團隊討論項目細節(jié)。
3、根據(jù)討論后的意見對實驗方案進行修改。
4、雙方均滿意并達成一致,簽訂技術服務合同。
5、開展實驗,按期完成合同規(guī)定的內容。
6、結題,提供實驗原始結果和分析結果、實驗流程、實驗條件等等。
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